
本發明公開一種枯草芽孢桿菌*胞外產物的制備方法。具體為將枯草芽孢桿菌發酵液超濾濃縮,沉淀制備的粗提物經Sephadex?G-100柱層析,以為指示菌檢測其*活性,收集活性峰。本發明分離提純工藝具有簡單、快速 操作條件溫和等特點。提取出的肽類*物質對多種*病原*具有很好的抑制效果,且具有對溫度、pH穩定等優點。
一種枯草芽孢桿菌*胞外產物的制備方法,其特征是該*胞外產物是通過以下步驟制備的:(1)枯草芽孢桿菌發酵液的制備:將枯草芽孢桿菌(Bacillius?subtilis)接種于LB培養基,搖床振蕩培養,得到枯草芽孢桿菌發酵液;所述LB培養基配制方法是:蛋白胨10g,酵母粉5g,NaCl?10g,水1000mL,pH?7.2?7.4,固體培養基需加瓊脂20g,121℃*20min,備用;(2)粗提液的制備:取上述制備的枯草芽孢桿菌發酵液經Millipore公司的切向流超濾系統超濾濃縮后,
以6000?8000r/min離心10min,取上清液并加入濃縮液2?3倍體積的*,0?4℃沉淀12h;然后再以10000?12000r/min離心15?20min收集上清,所得上清液經60℃旋轉蒸發濃縮至5mL,備用;(3)Sephadex?G?100柱層析:稱取Sephadex?G?100凝膠20g,充分溶漲,常規裝柱,床體積為200mL,柱子規格1.6cm×100cm,取0.5mL濃縮液加至Sephadex?G?100層析柱上,用去離子水洗脫,流速為0.2mL/min,用部分收集器每15min收集一管,收集30管,每管3mL;以作指示菌,采用牛津杯法檢測每管的*活性,收集并濃縮具有*的活性峰。





















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