黃曲霉毒素B1速測卡  5次測定用量

黃曲霉毒素B1檢測試紙卡使用說明書

方法編號：CDC-5512

1. 適用范圍與檢測意義：本品適用于谷物、飼料、食用油、調(diào)料和發(fā)酵酒等物質(zhì)中黃曲霉毒素B1（Aflatoxin B1簡寫為AFB1）的快速檢測。黃曲霉毒素B1是目前已知的化學(xué)物質(zhì)中致癌性很強(qiáng)的一種，對人和若干動物具有強(qiáng)烈的毒性，其毒性作用主要是對肝臟的損害。黃曲霉毒素B1是大部分食品的必檢項目之一。

2. 測定原理：本品采用高度特異性抗體抗原反應(yīng)及免疫層析分析技術(shù)，通過單克隆抗體競爭結(jié)合AFB1-BSA偶聯(lián)物和樣品中可能含有的AFB1的原理。試劑含有被事先固定于膜上測試區(qū)（T）的AFB1-BSA偶聯(lián)物和被膠體金標(biāo)記的抗AFB1單克隆抗體。檢出限為5ng/ml。

3. 所用器皿：常量天平±0.1g；蒸發(fā)皿或燒杯；量筒；滴管；移液管；小型粉碎機(jī)；離心機(jī)等。

4. 樣品制備：

4.1 谷物與飼料：取5g以上有代表性樣品并充分粉碎，準(zhǔn)確稱取2.0g均勻試樣于配套離心管中，向離心管中準(zhǔn)確加入2ml純凈水和8.0ml的乙酸乙酯，將瓶塞蓋緊密封，充分振蕩5min，4000rpm離心1分鐘，將上清液用吸管吸出2.0ml到小玻璃杯中，用電吹風(fēng)吹干液體，考慮不同樣品對黃曲霉毒素B1的zui高含量要求，可參考下表用稀釋液溶解杯底固體，用鋁箔袋內(nèi)配套吸管反復(fù)沖洗，*溶解杯底所有的固體，此溶解液即為樣品檢測液。

谷物中殘留*（ppb）
 5
 10
 20
 30
 40
 50
 100
 
使用稀釋液體積（ml）
 ０.４
 ０.８
 １.６
 ２.４
 ３.２
 ４
 ８
 
稀釋液滴瓶滴數(shù)（滴）
 8
 16
 32
 48
 64
 80
 160
 

4.2 食用油：稱取2.0g油樣于小燒杯中，用8ml正己烷分次將試樣轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，準(zhǔn)確加入4ml純凈水充分振蕩3min,吸去上層正己烷層,再加入4ml的乙酸乙酯，將瓶塞蓋緊密封，充分振蕩5min，靜置或離心得上清液，將上清液吸出2ml到小玻璃杯中，用電吹風(fēng)吹干，參照表格，根據(jù)殘留*量取相應(yīng)體積稀釋液復(fù)溶杯底固體。此溶解液即為檢測液。

食用油中殘留*（ppb）
 5
 10
 20
 30
 40
 50
 100
 
使用稀釋液體積（ml）
 0.6
 1.2
 2.4
 3.6
 4.8
 6.0
 12.0
 
稀釋液滴瓶滴數(shù)（滴）
 12
 24
 48
 72
 96
 120
 240
 

4.3 醬油、醋：準(zhǔn)確量取2.0ml樣品于15ml離心管中，準(zhǔn)確加入4.0ml乙酸乙脂，塞緊瓶塞后充分震蕩5min，靜置1~2min，待溶液分層以后將上清夜用移液槍（或移液管，吸管）全部轉(zhuǎn)移到另一只15ml離心管中，加入2.0ml 0.05M Na2CO3溶液，充分震蕩3min，用吸管取2mL上清液到小玻璃杯中，吹干濾液，參照表格，根據(jù)殘留*量取相應(yīng)體積稀釋液復(fù)溶杯底固體。此溶解液即為檢測液。

醬油、醋中殘留*（ppb）
 5
 10
 20
 30
 40
 50
 100
 
使用稀釋液體積（ml）
 1.0
 2.0
 4.0
 6.0
 8.0
 10
 20
 
稀釋液滴瓶滴數(shù)（滴）
 20
 40
 80
 120
 160
 200
 400
 

4.3  發(fā)酵酒：準(zhǔn)確量取2.0ml樣品于15ml離心管中，準(zhǔn)確加入4.0ml乙酸乙脂，塞緊瓶塞后充分震蕩5min，靜置1~2min，待溶液分層以后用吸管取2mL上清液到小玻璃杯中，吹干濾液，參照食用油樣品制備表格，根據(jù)殘留*量取相應(yīng)體積稀釋液復(fù)溶杯底固體。此溶解液即為檢測液。

5 測定

5.1 使用前將試紙卡和待檢樣本溶液恢復(fù)至室溫。

5.2 從原包裝袋中取出試紙卡，打開后平放在桌面上，在1小時內(nèi)盡快地使用。

5.3 用滴管吸取待檢樣品溶液，滴加3滴于加樣孔中，加樣后開始計時。

5.4 結(jié)果應(yīng)在5min時讀取，超過10min的時間判讀無效。

6 結(jié)果判定

6.1 陽性：C線顯示出紅色線條，T線不顯色，或C線顯示出紅色線條，而T線顏色非常模糊時，判為陽性。表明：AFB1含量超過樣品允許量。

6.2 陰性：C線顯示出紅色線條，T線同時顯示出紅色線條，且T線顏色接近C線或者深于C線時，判為陰性。表明：AFB1含量低于樣品允許量。

6.3 無效：C線不顯示出紅色線條，而T線顯示出紅色線條，該試紙卡判為無效。建議使用新的試紙卡重新測試。

7 說明

7.1 勿觸摸試紙顯示區(qū)。

7.2 發(fā)現(xiàn)過期，破損，污染時不可再用。

7.3 本品應(yīng)保存在干燥陰涼處（4-30℃），有效期18個月，生產(chǎn)日期見包裝。

7.4 本品為一次性產(chǎn)品，勿重復(fù)使用。

7.5 如遇稀釋液不足，可用蒸餾水加入稀釋液中混勻后使用。

7.6 本品為篩選方法，任何陽性結(jié)果請用其它方法作進(jìn)一步確認(rèn)。

7.7 有條件的實驗室可以用AFB1標(biāo)準(zhǔn)品作為判斷參考。

8 包裝：試紙卡5片，稀釋液1瓶，15ml離心管1支。