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ELISA常用夾心法原理及?操作步驟

2023年01月02日 16:54:16      來(lái)源：上海撫生實(shí)業(yè)有限公司 >> 進(jìn)入該公司展臺(tái)      閱讀量：23

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ELISA常用原理及操作步驟如下：

原理：針對(duì)抗原分子上2個(gè)不同抗原決定簇的單克隆抗體分別作為固相抗體和酶標(biāo)抗體，將大分子抗原分別制備固相抗原和酶標(biāo)抗原結(jié)合物。夾心法常用于檢測(cè)大分子抗原，一般的操作步驟為:

a. 將具有專(zhuān)一性的抗體固著（coating）于塑膠孔盤(pán)上，完成后洗去多余抗體

b. 加入待測(cè)檢體，檢體中若含有待測(cè)的抗原，則其會(huì)與塑膠孔盤(pán)上的抗體進(jìn)行專(zhuān)一性鍵結(jié)

c. 洗去多余待測(cè)檢體，加入另一種對(duì)抗原專(zhuān)一的一次抗體，與待測(cè)抗原進(jìn)行鍵結(jié)

d. 洗去多余未鍵結(jié)一次抗體，加入帶有酶的二次抗體，與一次抗體鍵結(jié)

e. 洗去多余未鍵結(jié)二次抗體，加入酶底物使酵素呈色，以肉眼或儀器讀取呈色結(jié)果


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