生物顯微鏡和金相顯微鏡用集光器的孔徑光闌調節像的亮度是顯微鏡初學者犯的錯誤之一，關閉孔徑光闌當然會減少通過的光量，但是它相應地改變了照明的光錐孔徑，并引起分辨力的損失和標本上衍射現象的增大，因而會嚴重地影響像的質量。

改變像亮度的方法是通過可變電阻調節燈變壓路上的電壓。當這種調節不能使用時(例如用簡單的高壓照明器)或為了一定的目的燈的電壓必須保持不變時(例如在顯微分光光度計和彩色顯微照相中)，像的亮度的最終變化應該使用濾光片來調節。

有經驗的觀察者在使用生物顯微鏡時，染色標本中一般傾向于使用較低的亮度，當然，過低亮度的昏暗像相應地會降低像的清晰度(而不是分辨力)，一定的細微結構就可能不太清晰。在用單目鏡筒觀察時，太低亮度的像將會促使觀察者疲勞并引起頭痛。但是，較暗的像對于觀察未染色的標本是有利的，這種未染色標本的反差主要取決于邊界上的衍射，這時集光器的孔徑光闌應該處于比染色標本關閉更小的位置上。

在金相顯微鏡中，常用的低壓鎢燈在光譜的發射分布中大部分處于較長的波長范圍，這些波長較長的紅光對眼睛來說是可見的，但是對于像的形成卻是沒有多大用處的。這種在可見光譜上缺乏短波部分的光源(圖中的實線)，可以使用在光的較短波長區域具有通透曲線的濾光片進行補償。例如，可以使用藍色濾片，這種被稱為“日光濾片“的藍色濾片能夠使低壓鎢燈的光譜曲線變平，它在藍光部分有較大的通透性(圖中的曲線I)，可以得到類似日光照明的效果，但是它得以大量光能的損失為代價。一種在光譜的550nm周圍的黃綠區顯示通透性(圖中的曲線II)，并且，更加符合人眼視覺敏感曲線的黃綠色濾光片具有非常良好的效果。它把光能的損失保持在一個可以接受的限度之內，可以被用于簡單類型的照明器中；而且在良好的染色中反差將顯得比使用藍濾光片或不使用濾光片更大，另外消色差物鏡正好在光譜在黃綠區域對球面差且示矯正，因此這種黃綠色濾光片被廣泛地應用于顯微觀察和黑白顯微照相。