分光光度計在使用時應放在干燥的房間內，使用時放置在堅固平穩的工作臺上，室內照明不宜太強。熱天時不能用電扇直接向儀器吹風，防止燈泡燈絲發亮不穩定。使用本儀器前，使用者應該首先了解本儀器的結構和工作原理，以及各個操縱旋鈕之功能。在未按通電源之前，應該對儀器的安全性能進行檢查，電源接線應牢固，通電也要良好，各個調節旋鈕的起始位置應該正確，然后再按通電源開關。在儀器尚未接通電源時，電表指針必須于“0”刻線上，若不是這種情況，則可以用電表上的校正螺絲進行調節。
　　環境濕度在條件容許的情況下，盡量保持在60%以下，這樣能保證光度計內部的光學件和電器件不易受潮、腐蝕、和上霉。若條件不容許，在高濕度和低濕度的情況盡量保持通風。
　　環境在條件容許的情況下盡量保持潔凈，打掃環境時動作不宜太大，不要揚起灰塵，打掃之前用防塵罩蓋上分光光度計，不要讓灰塵進入分光光度計內部。
　　環境溫度在條件容許的情況下，盡量保持在15-30攝氏度之間，這樣能保持電器件穩定工作，不易老化，使分光光度計不易損壞，燈源的使用壽命得到延長。若條件不容許，在高溫的情況下，縮短開機時間，使用分光光度計，使電器件不要長期保持在高溫下。在低溫下，使預熱時間比常溫下的預熱時間要長，這樣能保證在儀器穩定的情況下進行測試。