液相色譜有五大系統(tǒng)構(gòu)成：溶劑輸送系統(tǒng)（脫氣機、高壓泵等）、進樣系統(tǒng)（定量泵、六通閥、定量環(huán)、進樣針等）、分離系統(tǒng)（色譜柱等）、檢測系統(tǒng)（檢測器等）、記錄及數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)。其中檢測系統(tǒng)常用的檢測器有包括紫外可見吸收檢測器(UVD)、熒光檢測器(FD)、蒸發(fā)光檢測器（ELSD）、示差折光檢測器(RID)、電化學(xué)檢測器(ED)、化學(xué)發(fā)光檢測器(CD)、質(zhì)譜檢測器（MS）等類型，其技術(shù)要求為靈敏度高、噪音低、線形范圍寬、響應(yīng)快。
1、紫外可見吸收檢測器(UVD)：波長范圍190～800mm，190～400mm為紫外區(qū)域，氘燈，400～800mm為可見光區(qū)域，鎢燈。其特點為靈敏度高，小檢測濃度10-9g/ml，線性范圍寬，對溫度和流速不敏感，可進行梯度洗脫，應(yīng)用范圍廣。適用于帶有共軛基團的化合物，為常用的檢測器。
2、熒光檢測器(FD)：氘燈作激發(fā)光源，波長范圍250～600nm。其特點為靈敏度更高，檢測限10-12～10-13g/ml（靈敏度比UV檢測器高2～3個數(shù)量級），選擇性好，對溫度和流速不敏感，可進行梯度洗脫，所需試樣量少，適于痕量分析，應(yīng)用于組分吸收一定波長紫外光后發(fā)射熒光的物質(zhì)，且熒光強度與濃度成正比。
3、蒸發(fā)光檢測器（ELSD）：是一種通用型的檢測器，可檢測揮發(fā)性低于流動相的任何樣品，而不需要樣品含有發(fā)色基團。蒸發(fā)光散射檢測器靈敏度比示差折光檢測器高，對溫度變化不敏感，基線穩(wěn)定，適合與梯度洗脫液相色譜聯(lián)用。被廣泛應(yīng)用于碳水化合物、類脂、脂肪酸和氨基酸、藥物以及聚合物等的檢測。其主要缺點為響應(yīng)值與濃度不呈線性，需取響應(yīng)值的對數(shù)與濃度計算線性。
4、示差折光檢測器(RID)：是一種連續(xù)檢測樣品流路與參比流路間液體折光指數(shù)差值的通用型檢測器，其優(yōu)點為對糖類檢測靈敏度較高，其檢測限可達10-8g/ml；穩(wěn)定性好，操作方便，缺點該檢測器對多數(shù)物質(zhì)的靈敏度低（約10-5g/ml）,通常不用于痕量分析；受環(huán)境溫度、流動相組成等波動的影響較大，不適合梯度洗脫。
5、質(zhì)譜檢測器（MS）:將樣品中的分析物電離，不同質(zhì)量離子在電場或磁場中，將按其質(zhì)量和所帶的電荷比（質(zhì)荷比，m/z）進行的分離和排序，根據(jù)質(zhì)荷比的大小和相對強度形成規(guī)則的質(zhì)譜，從而對物質(zhì)進行結(jié)構(gòu)鑒別和定量分析。質(zhì)譜分析具有靈敏度高，樣品用量少，分析速度快，分離和鑒定同時進行等優(yōu)點，但流動相中不能含有無機鹽。
網(wǎng)站客服
