汞是污染普遍、毒性的重金屬，對人體健康造成了極大危害。傳統的 Ｈｇ２＋ 檢測方法如電 感耦合等離子體發射光譜法、原子熒光法、火焰原子吸收光譜法等已在實際檢測中得到很好的應用。 此外，采用諸如熒光分析、電化學傳感等技術進行 Ｈｇ２＋ 的快檢方法也得到廣泛報道，這些方法在一 定程度上實現了對 Ｈｇ２＋ 的 快 速 靈 敏 檢 測。即 便 如 此，繼續尋找高效快速的分析方法仍然是研究者在 Ｈｇ２＋ 檢測中一直努力的方向。
１ 實驗部分
１．１ 儀器與試劑
ＦＳ５型熒光光譜儀（英國，Ｅｄｉｎｂｕｒｇｈ公 司）；ＡＶＡＴＡＲ３６０型 傅 立 葉 變 換 紅 外 光 譜 儀（美 國，Ｎｉｃｏｌｅｔ 公司）；ＴＥＣＮＡＩＧ２Ｆ２０型高分辨率透射電子顯微鏡（美國，ＦＥＩ公司）；其林貝爾QL-866型振蕩器（江蘇海門其林貝爾儀器制造有限公司）；ＫＱ５２０ＤＢ型超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）。 牛血清白蛋白（ＢＳＡ）、ＨＡｕＣｌ４·３Ｈ２Ｏ 購 自 美 國 Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ 公 司；ＮａＯＨ、Ｎａ２ ＨＰＯ４·１２Ｈ２Ｏ， ＮａＨ２ＰＯ４·１２Ｈ２Ｏ、ＡｇＮＯ３、Ｈｇ（ＮＯ３）２等購自國藥集團化學試劑有限公司；其余試劑均為分析純。水為 去離子水。
１．２ 實驗方法
１．２．１ ＢＳＡ－Ａｕ／ＡｇＮＣｓ的合成
所有用于合成 ＢＳＡ－Ａｕ／ＡｇＮＣｓ的玻璃器皿事先都先用王水浸泡４ｈ，然 后用乙醇漂洗，最后用水沖洗干凈。合成方法參考方法。將５．０ｍＬ５０ｍｇ／ｍＬＢＳＡ 溶液和４．０ ｍＬ１．０×１０－２ ｍｏｌ／Ｌ ＨＡｕＣｌ４溶液混合，接著加入１．０ｍＬ不同濃度的 ＡｇＮＯ３溶液，室溫振蕩１０ｍｉｎ，立 即加入１．０ｍＬ１．０×１０－３ ｍｏｌ／ＬＮａＯＨ 溶液，在３７℃下反應１２ｈ。將反應液先使用３００００ＭＷ 的濾膜處 理，４℃下３０００ｒ／ｍｉｎ離心１５ｍｉｎ，去除未反應的ＢＳＡ。再使用水對其透析４８ｈ（每６ｈ換一次水），以除 去未反應的 ＨＡｕＣｌ４和 ＮａＯＨ。最后將得到的 ＢＳＡ－Ａｕ／ＡｇＮＣｓ溶液４℃放置以備用。取１ｍＬ 溶液凍 干后稱重，計算得到最終 ＢＳＡ－Ａｕ／ＡｇＮＣｓ母液的濃度為３．４ｍｇ／ｍＬ。
１．２．２ Ｈｇ２＋ 的熒光檢測
取１００μＬ上述 ＢＳＡ－Ａｕ／ＡｇＮＣｓ溶液，加９００μＬ濃度為２．０×１０－２ ｍｏｌ／Ｌ 磷 酸鹽緩沖液（ＰＢＳ，ｐＨ＝７．０），得到濃度為０．３４ｍｇ／ｍＬ的ＢＳＡ－Ａｕ／ＡｇＮＣｓ溶液。分別移取１μＬ不同濃 度的 Ｈｇ２＋ 溶液加入到１ｍＬ上述 ＢＳＡ－Ａｕ／ＡｇＮＣｓ溶液中，進行熒光測定。
２ 結果與討論
圖１Ａ 為 ＢＳＡ－Ａｕ／ＡｇＮＣｓ在激發波長２８０ｎｍ 處的熒光光譜圖，由圖可見發射波長為６２５ｎｍ。 這些熒光特征與報道的基本一致，表明實驗已經成功合成了 ＢＳＡ－Ａｕ／ＡｇＮＣｓ。日 光 下 制 備 的 ＢＳＡ－Ａｕ／ＡｇＮＣｓ呈棕黃色（如圖１Ａ 插圖ａ），而在３６５ｎｍ 的紫外燈下顯示出很強的橘紅色熒光，如圖１ 插圖ｂ所示。 圖１ ＢＳＡ－Ａｕ／ＡｇＮＣｓ的熒光光譜（Ａ）和紅外光譜（Ｂ）圖 Ｆｉｇ．１ Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｓｐｅｃｔｒａ（Ａ）ａｎｄＩＲｓｐｅｃｔｒａ（Ｂ）ｏｆＢＳＡ－Ａｕ／ＡｇＮＣｓ ＩｎｓｅｔａｉｎＦｉｇ．Ａ：ＩｍａｇｅｏｆＢＳＡ－Ａｕ／ＡｇＮＣｓｕｎｄｅｒｔｈｅｄａｙｌｉｇｈｔｌａｍｐ；Ｉｎｓｅｔｂ：ＩｍａｇｅｏｆＢＳＡ－Ａｕ／ＡｇＮＣｓｕｎｄｅｒ３６５ｎｍ ＵＶｌｉｇｈｔ； Ｉｎｓｅｔｃ：ＨＲＴＥＭｉｍａｇｅｏｆＢＳＡ－Ａｕ／ＡｇＮＣｓ． 利用高分辨透射電鏡（ＨＲＴＥＭ）研究了合成的 ＢＳＡ－Ａｕ／ＡｇＮＣｓ的尺寸。如圖１插圖ｃ所示，可以觀 察到合成的 ＢＳＡ－Ａｕ／ＡｇＮＣｓ尺寸約４ｎｍ，表明 ＢＳＡ－Ａｕ／ＡｇＮＣｓ具有高度結晶的結構。利用紅外光譜 表征了 ＢＳＡ－Ａｕ／ＡｇＮＣｓ的結構信息，結果如圖１Ｂ所示。其中曲線ａ為 ＢＳＡ－Ａｕ／ＡｇＮＣｓ的紅外譜，曲線 ｂ為 ＢＳＡ 的紅外光譜。與 ＢＳＡ 的紅外光譜相比，ＢＳＡ－Ａｕ／ＡｇＮＣｓ的紅外光譜在１６５４ｃｍ－１的特征吸收 峰有較為明顯的減弱，這表明反應后蛋白質的α 螺旋結構減少了，蛋白質的二級結構發生了改變，同時在 蛋白質中巰基與 Ａｕ、Ａｇ形成共價鍵。
３ 結論
ＢＳＡ 為模板，以 ＨＡｕＣｌ４ 和 ＡｇＮＯ３ 為原料，合成了一種高熒光強度的 Ａｕ、Ａｇ合金簇 ＢＳＡ－ Ａｕ／ＡｇＮＣｓ。實驗發現，由于 Ｈｇ２＋ 與 ＢＳＡ－Ａｕ／ＡｇＮＣｓ表面的 Ａｕ＋ 存在的高特異性的噬金屬效應，因而 能顯著猝滅合金簇的熒光信號。進一步以該 ＢＳＡ－Ａｕ／ＡｇＮＣｓ為熒光探針，開發了一種快速檢測 Ｈｇ２＋ 的方法。該檢測方法操作簡單，快速，靈敏度較高，不需復雜儀器；同時，合成的合金簇綠色環保。
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