乳腺癌細胞凋亡水平上升時，包括 miR?145?5p 在內的多種 miRNA 水平上升 。miR?145?5p 與 ATF1 和乳腺癌細胞凋亡之間的聯系，本研究旨在探討 miR?145?5p 靶向調控 ATF1對乳腺癌細胞 MCF7 凋亡的影響。胎 牛 血 清（Thermo 公司）、1640 培養基（GE 公司）、pmiR?RB?Report 質粒（上海欽誠）、HiPerFect Transfection Reagent（德國凱杰），P21、BAX、ATF1、BCL?2、Caspase9、Tubulin抗體（英國 ABCAM），蛋白裂解液（碧云天）、山羊抗大鼠 IgG 和山羊抗兔 IgG（H+L）（艾美捷）、PBS（上海生工）、蛋白酶抑制劑（上海睿鉑賽）、青鏈霉素 混 合 液（上 海 索 寶）、ClonExpress II One StepCloning 試劑盒（南京諾唯贊），Luciferase 熒光素酶報告檢測試劑盒（武漢艾美捷），U6 和 miR?145?5p熒光定量 PCR 引物、qPCR 和 miRNA 反轉錄試劑盒（廣 州 復 能 基 因），miRNA 快 速 提 取 試 劑 盒（HaiGene）、Western blot 裝置（美國伯樂公司），細胞培養箱、生物安全柜購和酶標儀（美國 Thermo）、微量加樣器（法國 Gilson）、冷凍離心機（德國 Ep?pendorf）、旋轉搖床（江蘇海門市其林貝爾）、脫色搖床（大龍興創）、熒光定量 PCR 儀（美國 ABI）；miR?145?5p 序列來自 miRBase，miR?145?5p 模似物和 miR?145?5p 抑制物由上海生工生物工程股份有限公司合成。

    miRNA 是 內 源 性 22nt 非 編 碼 RNA，其 靶 向mRNA 用于切割或翻譯抑制。許多 miRNA 調節程序性細胞死亡，包括細胞凋亡、自噬和壞死性凋亡。一系列研究表明，miR?145?5p 是幾種腫瘤的腫瘤抑制因子，如結腸癌 、乳腺癌、和前列腺癌 ，而 miR?145?5p 抑制乳腺癌的機制尚未報道。ATF1 是構成基本拉鏈轉錄因子的亞家族的一員，介導各種細胞外信號的轉錄反應，它參與細胞活力和細胞轉化 。