分析方法及標準：

鉬酸銨分光光度法

儀器：

立式高壓滅菌鍋、紫外分光光度計、50mL比色管。

藥劑配置：

1、5％過硫酸鉀溶液：溶解5g過硫酸鉀于水中，并稀釋至100mL。

2、（1＋1）硫酸：將150mL濃硫酸緩緩倒入150mL蒸餾水中。

3、10％抗壞血酸溶液：溶解10g抗壞血酸于水中，并稀釋至100m溶液貯存在棕色試劑瓶中，在約4℃可穩定幾周。

4、鉬酸鹽溶液：溶解13g鉬酸銨于100mL水中。溶解0.35g酒石酸銻鉀于100mL水中。在不斷攪拌下，將鋁酸銨溶液徐徐加到300mL（1＋1）硫酸中，加酒石酸銻鉀溶液并混合均勻。貯存在棕色試劑瓶中，在冷處可保存二個月。

標準溶液配置：

磷標準貯備溶液（50mg／L）：將優級純磷酸二氫鉀于110℃干燥2h，在干燥器中放冷。稱取0.2197±0.001g溶于水，移入1000mL容量瓶中，加入大約800mL水，加（1-1）硫酸5mL，用水稀釋至標線。磷標準使用溶液（2mg／L）：吸取10.00磷酸鹽貯備液于250mL容量瓶中，用水稀釋至標線。

標準曲線繪制：

分取量取磷酸鹽標準溶液0.00、0.50、1.00、3.00、5.00、10.00、15.00mL于50mL具塞磨口玻璃比色管中，加水稀釋至25mL標線，再加入4mL過硫酸鉀溶液，然后按檢測步驟2、3、進行處理。

檢測步驟：

1、取適量水樣于50mL比色管中，稀釋至25ml（同做空白），加入4mL過硫酸鉀溶液：

2、將比色管蓋富后，用棉線和紗布扎緊搖勻后，放入離壓滅菌鍋中加熱，特加熱120℃時，計時30分鐘后停止加熱；待壓力表讀數降至零時，取出放冷，然后用水稀釋至標線：

3、再加入1mL抗壞血酸溶液，2mL鉬酸鹽溶液，蓋塞搖勻，靜置15分鐘后，在波長700nm處，用光程30mm比色皿，以燕餾水為參比，測量吸光度。

計算：

總磷含量C（mg／L）＝m/v    

m-試樣測得含磷量, 單位：ug

V-測定用試樣體積，單位：mL

檢測原理：

在中性條件下用過硫酸鉀使試樣消解，將所含磷全部氧化為正磷酸鹽。在酸性介質中，正磷酸鹽與鉬酸銨反應，在銻鹽存在下生成磷鉬雜多酸后，立即被抗壞血酸還原，生成藍色絡合物。

技術要求：

1、校準曲線相關系數R值必須大于0.999。

2、比色皿用后應以稀硝酸或鉻酸洗液浸泡片刻，可以去除吸附的鉬藍有色物。

3、如顯色時室溫低于12℃，可在20-30℃水浴中顯色15min即可。 

安全注意：

1、使用前要檢查玻璃儀器是否有破損，不要使用有缺口或裂縫的玻璃器皿。

2、配制稀硫酸時，將濃硫酸緩緩沿杯壁倒入，要緩慢的加入，倒入時，邊倒入邊攪拌用玻璃棒。

3、使用高壓滅菌鍋，注意檢查桶內水量是否足夠、螺絲是否檸緊以及消解后壓力表讀數是否為零時才取出試樣。