測定方法: 微量法
測定規格: 100T/96S
保存條件: 低溫避光保存
有 效 期: 6個月
注 意 : 正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義:
AchE屬于水解酶,廣泛存在于各種動物組織和血清中。AchE催化乙酰(Ach)水解。測定原理:
AchE催化Ach水解生成,與二硫對硝基苯甲酸(DTNB)作用生成5-巰基-硝基苯甲酸(TNB);TNB在412nm處有吸收峰,通過測定412 nm吸光度增加速率,計算AchE活性。
自備儀器和用品:
可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、低溫離心機、水浴鍋、可調式移液槍和蒸餾水。粗酶液提取:
1.組織:按照組織質量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行冰浴勻漿,8000g 4℃離心10min,取上清液待測。2.按照細胞數量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后8000g,4℃,離心10min,取上清置于冰上待測。
3.血清等液體:直接測定。
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