脫氫抗壞血酸還原酶(DHAR)活性測試盒
測定方法: 微量法
測定規格: 100T/96S
保存條件: 低溫避光保存
有 效 期: 6個月
注 意: 正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義:
DHAR存在于細胞質、線粒體和葉綠體中。DHAR催化GSH還原DHA生成AsA和GSSG,調控細胞AsA/DHA比值,是抗壞血酸-氧化還原循環的關鍵酶。提高植物體內的 DHAR 活性,可提高植物食品中AsA含量,進而提高植物食品的營養品質。
測定原理:
DHAR催化GSH還原DHA生成AsA,通過測定DHA減少速率,計算DHAR活性。
實驗中所需儀器及設備:
研缽、冰、低溫離心機、紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板(UV板)、可調式移液器和蒸餾水。
粗酶液提取:
1.按照組織質量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行冰浴勻漿。8000g,4℃離心10min,取上清置冰上待測。
2. 按照細胞數量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);8000g 4℃離心20min,取上清液置冰上混勻待測。
3. 血清等液體:直接測定。
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