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1 材料
BP211D 型 1/1 萬天平(德國(guó) Sartorius 公司);BDS400 型倒置顯微鏡(中國(guó) Opetec 公司);SC3610 型低速離心機(jī)(安徽中科中佳科學(xué)儀器有限公司);HF212 型二氧化碳培養(yǎng)箱(上海力申科學(xué)儀器有限公司);YT-CJ-1N 型超凈工作臺(tái)(北京亞泰科隆儀器技術(shù)有限公司);Multiskan FC 型酶標(biāo)儀[賽默飛世爾(上海)儀器有限公司];TS-1 型水平脫色搖床( 海門市其林貝爾儀器制造有限公司 );LDZF75L-11 型立式高壓蒸汽滅菌器(上海申安廠);KQ-100E 型超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司);FACS CantoⅡ流式細(xì)胞儀(美國(guó) BectonDickinson 公司);ChemiDocTM型 MP Imaging System(美國(guó) Bio-Rad 公司)。
2 方法
As2O3溶液配置:將購(gòu)買的化 合 物 溶 解 于 1 mol·L-1 的 中 ,加 入1 mol·L-1的鹽酸調(diào) pH 至 7.0,再加入生理鹽水將其稀釋成濃度為 10 mmol·L-1的鹽溶液,濾過除菌,4 ℃冰箱保存?zhèn)溆谩ER用前取少量鹽溶液,用 RPMI 1640 培養(yǎng)基稀釋成所需濃度。DHA 溶液配置,將購(gòu)買的化合物溶解于 DMSO,配制成濃度為 100 mmol·L-1 的 DHA 濃溶液,濾過除菌,4 ℃冰 箱 保 存 備 用 。 臨 用 前 取 適 量 DHA 濃 溶 液 ,用RPMI 1640 培養(yǎng)基稀釋成所需濃度。將 THP-1 細(xì)胞培養(yǎng)于含 10% 胎牛血清,1% 青-混合液(100 U·mL-1 和100 mg·L-1)和 0.05 mmol·L-1的 β-巰基乙醇的 RPMI 1640 培養(yǎng)基中,培養(yǎng)于 37 ℃,5% CO2飽和濕度的培養(yǎng)箱中。根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)情況,每 2~3 d 半換液法傳代 1 次。
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