(Pepsin)測試盒
測定方法: 微量法
測定規格: 100T/48S
保存條件: 低溫避光保存
有 效 期: 6個月
注 意: 正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義:
由胃粘膜主細胞分泌,分解食物中蛋白質成小肽段。一般用于神經性低酸癥的鑒別,也會引起分泌的減少。
測定原理:
可催化血紅蛋白水解,水解產物與福林試劑反應后顯藍色;一定范圍內,其顏色的深淺與活性呈正比。
自備儀器和用品:
可見分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96孔板、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、研缽、冰和蒸餾水。
測定步驟:
1.分光光度計/酶標儀預熱30min,調節波長到580 nm,蒸餾水調零。
2. 試劑三和試劑四置于37℃水浴預熱30min。
3. 標準管:取微量玻璃比色皿/96孔板,加入20μL標準品,40μL試劑二,120μL試劑五,20μL試劑六,混勻后室溫靜置20min,于580 nm測光吸收,記為A標準管。
4. 空白管:取微量玻璃比色皿/96孔板,加入20μL蒸餾水,40μL試劑二,120μL試劑五,20μL試劑六,混勻后室溫靜置20min,于 580 nm測光吸收,記為A標準空白管。
5. 對照管:取 EP管,加入100 μL蒸餾水,置于37℃水浴保溫10min;加入100μL試劑四,蓋緊后搖勻1min;加入20μL粗酶液,混勻后8000g 4℃離心10分鐘取上清;在微量玻璃比色皿/96孔板加入上清液20μL,再加入40μL試劑二,120μL試劑五,20μL試劑六,混勻后室溫靜置20min,于580 nm測光吸收,記為A空白管。
6. 測定管:取 EP管,加入20μL粗酶液,100μL試劑三,置于37℃水浴保溫10min;加入100μL試劑四,
蓋緊后搖勻1min;8000g 4℃離心10分鐘取上清;在微量玻璃比色皿/96孔板加入上清液20μL,再加入40μL試劑二,120μL試劑五,20μL試劑六,混勻后室溫靜置20min,于 580 nm測光吸收,記為A測定管。
注意:空白管和標準管只需要測定一次。
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