操作方法： 細胞毒性檢測 1. 接種細胞：接種對數期的細胞至96孔板，接種數量1~5×103個/孔，每孔100 μl，每組設置3~5個復孔，置于37℃，5% CO2培養箱；
2. 樣品處理：待細胞貼壁后，加入不同濃度的樣品處理細胞，然后置于培養箱中孵育一定的時間（如：24 h、48 h、72 h）；
3. CCK-8孵育：每孔加入10 μl的CCK-8試劑，輕輕混勻，并將培養板置于37℃，5% CO2培養箱中孵育1~4 h；（可進行預實驗確定孵育時間）；
4. 上機檢測：將孵育后的細胞培養板置于酶標儀上，在450 nm處檢測其吸光值；
儲存條件: 4℃保存，半年有效；-20℃保存，兩年有效；
僅供科學研究使用:
2. 以Hela細胞為例，細胞按×103 ~ 20×103個/孔的密度梯度接種至96孔板中，培養4 h后，待細胞貼壁，每孔加入10 μl的CCK-8試劑，輕輕混勻，置于培養箱中孵育1 h后，在450 nm處檢測其吸光值，并制作標準曲線。

注意事項：
1. 使用前先將低溫保存的試劑在室溫條件下放置20-30 min。
2. 接種對數期生長的細胞，注意使細胞分散均勻，確保每個復孔中的細胞數量一致，減少誤差。
3. 為了達到的實驗效果，建議*行預實驗，確定的細胞接種密度及CCK-8試劑孵育時間；以貼壁細胞為例，接種密度約1~5×103個/孔；孵育時間為1~4 h，多數細胞孵育約30 min即可觀察到明顯的顏色變化。
4. 設置空白對照，在無細胞的培養基中加入CCK-8檢測，去除本底對吸光值的干擾。
5. 如果OD值太高，建議降低細胞接種密度或減少CCK-8試劑孵育時間。